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Reducción de las colonias de Clostridium perfringens por acción del anillo cimenol en placas de cultivo

Reducción de las colonias de Clostridium perfringens por acción del anillo cimenol en placas de cultivo

Introducción

El anillo cimenol es una microbicida intestinal de origen botánico. Se ha probado su eficacia como bactericida y fungicida en la prevención y tratamiento de la enteritis necrótica causada por Clostridium perfringens (CP).

Objetivo

Demostrar la eficacia del anillo cimenol como micobiocida contra CP mediante la observación de la reducción de UFC en placas de cultivo.

Metodología

1. Se preparan las siguientes diluciones de anillo cimenol: 1:10000, 1:5000 y 1:2500; correspondientes a 100, 200 y 400 ppm
2. Se añaden las distintas concentraciones a cultivos de enterocitos porcinos de la línea IPEC-J2
3. Se añade CP a los cultivos y se incuban
4. Se aspira el medio de los cultivos y se resuspende la fracción celular
5. Se realizan diluciones seriadas de estas suspensiones
6. Las diluciones se plaquean en profundidad en agar TSC y se incuban
7. Obtención de las siguientes placas:

  • Control negativo: sin CP y sin cimenol
  • Control positivo: solo CP, sin cimenol
  • AN 1:10000: lisado con CP y cimenol a 100 ppm
  • AN 1:5000: lisado con CP y cimenol a 200 ppm
  • AN 1:2500: lisado con CP y cimenol a 400 ppm

8. Se observa el crecimiento de colonias de CP (UFC/placa)

Resultados

Las imágenes muestran el crecimiento de CP en las distintas placas.

Crecimiento de Clostridium Perfringens mostrado en placas

Interpretación
  • No hay crecimiento de Clostridium en la placa control negativo
  • Hay un mayor crecimiento de Clostridium en la placa control positivo (CP sin tratamiento)
  • El crecimiento se reduce con el uso de anillo cimenol. Existe una relación dosis-efecto (a mayor concentración de cimenol, menor crecimiento de Clostridium).
  • En la placa correspondiente al tratamiento a 400 ppm, únicamente se observan 4 colonias. Lo que significa que el crecimiento de CP ha sido casi completamente inhibido.
Conclusiones

El anillo cimenol tiene un efecto biocida sobre Clostridium perfringens, que se observa por una disminución del recuento de bacterias intracelulares en enterocitos en contacto con el producto.

Esta disminución es particularmente significativa cuando el producto se administra a 400 ppm.

En conclusión, el anillo cimenol puede utilizarse como biocida intestinal para prevenir infecciones por Clostridium.

El anillo cimenol se comercializa bajo el nombre comercial Alquermold Natural por Biovet, S.A.

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